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              人雌二醇(E2)elisa試劑盒
              參考價:

              型號:

              更新時間:2022-06-17  |  閱讀:690

              詳情介紹

              (試劑盒僅供科研使用,不得用于臨床診斷?。?/span>

              人雌二醇(E2)elisa試劑盒

              使用說明書


              檢測原理

              試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人雌二醇(E2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人雌二醇(E2)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


              樣品收集、處理及保存方法

              1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

              2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

              3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

              4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

              5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


              自備物品

              1. 酶標儀(450nm)

              2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

              3. 37℃恒溫箱


              操作注意事項

              1.  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡60分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。樣本在使用前也要在室溫平衡60分鐘。

              2.  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

              3.  預處理后的樣本無需稀釋,直接取10μL加樣即可。

              4.  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

              5.  所有液體組分使用前充分搖勻。


              試劑盒組成

              名稱

              96孔配置

              48孔配置

              備注

              微孔酶標板

              12孔×8條

              12孔×4條

              標準品

              0.3mL

              0.3mL

              樣本.稀釋液

              6mL

              3mL

              檢測抗體-HRP

              10mL

              5mL

              20×洗滌緩沖液

              25mL

              15mL

              按說明書進行稀釋

              底物A

              6mL

              3mL

              底物B

              6mL

              3mL

              終止液

              6mL

              3mL

              封板膜

              2張

              2張

              說明書

              1份

              1份

              自封袋

              1個

              1個

              注:標準品濃度依次為:8、4、2、1、0.5、0 ng/mL.


              試劑的準備

              20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。


              洗板方法

              1.  手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

              2.  自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。


              操作步驟

              1.  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

              2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

              3.  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀.釋液40μL;

              4.  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

              5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

              6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

              7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。


              結果判斷

               繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。


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              試劑盒性能

              1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

              2.  靈敏度:最.低檢測濃度小于0.1 ng/mL。

              3.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

              4.  重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。

              5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

              6.  有效期:6個月


              免責聲明

              1.   試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

              2.   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。


              生產企業

              企業名稱:北京生研生物技術有限公司

              地    址:北京市昌平區科技園區超前路甲1號11號樓7層

               

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